維生素K,又名葉綠醌,在食物和人體中廣泛存在,維生素是凝血因子γ-羧化酶的輔酶。而其它凝血因子7、9、10的合成也依賴于維生素K 。人體缺少它,凝血時(shí)間延長(zhǎng),嚴(yán)重者會(huì)流血不止,甚至死亡。維生素K還參與骨骼代謝,原因是維生素K參與合成BGP(維生素K依賴蛋白質(zhì)),BGP能調(diào)節(jié)骨骼中磷酸鈣的合成。為了解決上述問題,本文公開了一種血液中維生素K的檢測(cè)方法。
本技術(shù)方案為:血液中維生素K的檢測(cè)方法,包括下列步驟:
(1)提供血液樣本,對(duì)血液樣品在8000rpm-9000rpm的高速離心機(jī)進(jìn)行離心16min-18min;取上清液至樣品瓶中,下層溶液人再提取,在常溫溫度下,用氮?dú)獯蹈桑殖?-10個(gè)樣本;
(2)將待測(cè)樣本經(jīng)色譜柱色譜分離:色譜柱,柱溫為40-43℃,流速:0 .3-0 .42mL/min,進(jìn)樣量:6μL-8μL;
(3)采用MS檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定,條件為C18柱;流動(dòng)相由水相和有機(jī)相組成,水相包括水、甲酸和甲醇組成,且甲酸和甲醇與水的體積比為0 .2-0 .4%,甲醇分別稀釋成2、4、8、10、20、50ng .mL-1標(biāo)準(zhǔn)溶液;全過程在流速為0 .7-0 .9mLmin的條件下進(jìn)行梯度洗脫。
優(yōu)選地,流動(dòng)相運(yùn)行時(shí)間為6-8min。
優(yōu)選地,下層溶液重復(fù)提取2-3次。
這款高速離心機(jī)的有益之處:本發(fā)明相比傳統(tǒng)的檢測(cè)維生素K的方法,有效提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性,分析時(shí)間段,能夠快速得出結(jié)果,簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì),結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確。
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